性交后试验的体外研究

　　性交后试验结果阴性或异常是进行体外宫颈黏液-精子穿透试验的指征。体外观察精子穿透宫颈黏液的能力可用 3种不同的技术：① 玻片法；② 精子-宫颈黏液接触法；③ 毛细管试验。

　　前两种方法操作简便且能提供有用的信息。毛细管试验则是一种较复杂的半定量的测定方法，用以检测精子穿透宫颈黏液水平。

　　必须用射精后不超过 1 h的新鲜精液进行这些体外试验。

　　一、玻片试验

　　（一）操作方法

　　滴一滴宫颈黏液于载玻片上，并用盖玻片（25 mm × 40 mm）压平。精液滴在两端，并与盖玻片边缘接触，以便精液能在盖片下凭借毛细管作用力而移动。在这种情况下宫颈黏液和精液间会形成一个明显的交界面。在这个交界面，精液几分钟内即形成一个密集带，或呈指状突起或呈弧形。大多数精子在进入黏液时先穿透弧形密集带的管道。在很多数情况下一个精子可带领一串精子进入黏液。一旦进入宫颈黏液，精子呈扇形散开并自由运动。有一些精子回到精浆层，而大部分则向宫颈黏液的深层移动，直至遇到白细胞碎片。试验解释，从交界面开始计算每高倍视野下的精子数，密集带中的精子不包括在内，仅统计明显进入宫颈黏液的精子，为了进行定量分析，从交界面开始的第 1个显微镜高倍视野称作 F1，分别在试验开始后 5和 15min计数（放大 400倍），每次试验必须记录放大倍数。为了观察穿透的深度，第 2个视野（F2）应紧接第 1个视野（F1），同样可计算第 3个视野，并记录每个视野内的精子数。

　　（二）结果解释

　　结果评价如下：

　　（1）极好：第一视野（F1）≥25精子 /高倍视野（HPF）；第二视野（F2）≥25精子 /HPF。

　　（2）好：F1：15个精子 /HPF；F2：10个精子 /HPF。

　　（3）差：F1：5个精子 /HPF；F2：0～ 1个精子 /HPF。

　　（4）阴性：F1或 F2无精子穿透。

　　如果是为了比较不同宫颈黏液的性质，那么必须用具有最佳数量、活动力和形态的同一精液样品进行该试验，另一方面如果是为了评价不同精液样品的性质，那么必须用同一宫颈黏液样品来评价精子穿透黏液的能力。

　　二、精子-宫颈黏液接触试验

　　（一）操作方法

　　此试验的目的是检测宫颈黏液和（或）精子中是否有抗精子抗体。

　　精子-宫颈黏液接触（sperm cervicalmucuscontact，SCMC）试验的操作方法是在玻片的一端放少量（约 10～ 50μL）的排卵前宫颈黏液和等量的新鲜精液，并把两者充分混匀。从同一精液标本中再取一滴置于玻片的另一端，覆以盖玻片。然后将准备液放置于湿润的 petri皿中（室温）。30min后，测定快速晃动精子的百分率。另一端的精液作为精子活性的对照，不活动的及缓慢晃动的精子不计算在内。凡是晃动的精子，即使伴有缓慢的或间断性前向运动，均应被认为属于晃动的精子。

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